La tinción de May-Grünwald Giemsa es utilizada por la mayor parte de los citólogos que estudian preparaciones por PAAF.
Esta técnica combina los principios de coloraciones desarrollados por May-Grünwald y Giemsa, usando 2 soluciones colorantes:
a) Solución May-Grünwald: Contiene eosina (colorante aniónico/ácido) y azul de metileno (colorante catiónico), en solución alcohólico, concretamente disueltos en metanol.
b) Solución Giemsa: Contiene Eosina, azul de metileno y productos derivados de la oxidación del azul de metileno.
Los componentes celulares se clasifican por esta tinción en:
a) Componentes anióncos (ácidos): al unirse a los tintes catiónicos se tiñen en tonos azules.
Serán estructuras basófilas.
b) Componentes catiónicos (básicos): se unirán a la eosina, tiñendo en varios tonos rojizos o anaranjados.
Son los componentes acidófilos o eosinófilos.
Estructuras que tiñe:
Protocolo:
1) Prepararemos una bandeja con varillas para apoyar las extensiones citológicas.
2) Fijación: Aplicar a los frotis secos (secados al aire) con una micropipeta solución de May-Grünwald durante 3 minutos.
3) Sin lavar, aplicar agua destilada para diluir la solución de May-gründwald*1 y dejar actuar otros 3 minutos.
4) Giemsa: Sin lavar, escurrir el colorante sobre la preparación y aplicar solución de Giemsa durante 20 minutos. Retirar y escurrir.
5) Lavar el frotis con abundante agua destilada.
6) Limpiar el dorso de la preparación.
7) Secar al aire dejando las preparaciones inclinadas con un ángulo de unos 45º y la extensión por la parte interior (minimizamos “gotas” sobre la muestra).
8) Montar de la manera habitual.
*Debemos saber que la solución de May-Grünwald se prepara a partir de MG comercial en polvo, a una concentración del 0,25% en metanol (P/V) y la solución extemporánea de Giemsa se preparar a partir de Giemsa comercial líquido, a razón de 1 gota por cm3.
Esqema:
Esta técnica combina los principios de coloraciones desarrollados por May-Grünwald y Giemsa, usando 2 soluciones colorantes:
a) Solución May-Grünwald: Contiene eosina (colorante aniónico/ácido) y azul de metileno (colorante catiónico), en solución alcohólico, concretamente disueltos en metanol.
b) Solución Giemsa: Contiene Eosina, azul de metileno y productos derivados de la oxidación del azul de metileno.
Los componentes celulares se clasifican por esta tinción en:
a) Componentes anióncos (ácidos): al unirse a los tintes catiónicos se tiñen en tonos azules.
Serán estructuras basófilas.
b) Componentes catiónicos (básicos): se unirán a la eosina, tiñendo en varios tonos rojizos o anaranjados.
Son los componentes acidófilos o eosinófilos.
Estructuras que tiñe:
- Núcleos: azul púrpura
- Citoplasmas: violeta pálido o marrón.
- Si la aplicamos sobre sangre, veremos:
- Gránulos de los neutrófilos: violeta marrón
- Gránulos de los eosinófilos: naranja
- Gránulos de los basófilos: azul-negro
- Gránulos de linfocitos: púrpura
Protocolo:
1) Prepararemos una bandeja con varillas para apoyar las extensiones citológicas.
2) Fijación: Aplicar a los frotis secos (secados al aire) con una micropipeta solución de May-Grünwald durante 3 minutos.
3) Sin lavar, aplicar agua destilada para diluir la solución de May-gründwald*1 y dejar actuar otros 3 minutos.
4) Giemsa: Sin lavar, escurrir el colorante sobre la preparación y aplicar solución de Giemsa durante 20 minutos. Retirar y escurrir.
5) Lavar el frotis con abundante agua destilada.
6) Limpiar el dorso de la preparación.
7) Secar al aire dejando las preparaciones inclinadas con un ángulo de unos 45º y la extensión por la parte interior (minimizamos “gotas” sobre la muestra).
8) Montar de la manera habitual.
*Debemos saber que la solución de May-Grünwald se prepara a partir de MG comercial en polvo, a una concentración del 0,25% en metanol (P/V) y la solución extemporánea de Giemsa se preparar a partir de Giemsa comercial líquido, a razón de 1 gota por cm3.
Esqema:
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